了解細(xì)胞離心機(jī)從這些方面入手
細(xì)胞離心機(jī)顧名思義用于細(xì)胞分析,那我們從細(xì)胞分析方法入手即可。
先了解下離心分離純化法,親和純化-免疫磁珠分離純化法。
從概念上來講前者比較簡單,只需要離心機(jī)破壁,然后離心分層再提純。這是簡單又傳統(tǒng)的分析方法,比較適用于初步的研究,但是這里面也是有方法的,不同細(xì)胞組物的分離提純都是靠離心機(jī)的不同轉(zhuǎn)數(shù)調(diào)節(jié)而來。
后者就比較復(fù)雜了,從孵育——磁性分選——洗脫。詳細(xì)概念解說如下:
免疫磁珠或稱免疫磁性微球,具有超順磁性,可通過抗體與靶細(xì)胞器特異性結(jié)合并使之具有磁響應(yīng)性。將免疫磁珠與待分離的混合物共同孵育,免疫磁珠就可通過抗原抗體反應(yīng)選擇性地與靶細(xì)胞器物質(zhì)結(jié)合,當(dāng)此復(fù)合物通過一個(gè)磁場裝置時(shí),與免疫磁珠結(jié)合的靶細(xì)胞器就會被磁場滯留,從而與其他復(fù)雜物質(zhì)分離開來。
兩者比較:
前者方法簡單,所以以量取勝,但是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精細(xì)度上會受限。
比如:
a.差速離心法貼壁效應(yīng)嚴(yán)重,常在離心管的一側(cè)出現(xiàn)沉淀,導(dǎo)致顆粒被擠壓變形而失活;
b.無法將具有相似密度、大小的不同細(xì)胞器分離開來,例如微粒體和過氧化物酶體等;
c.對于異質(zhì)型細(xì)胞器(即具有不同密度、大小的同一類變異細(xì)胞器)無法兼顧,只能選擇收集某一密度范圍的,對于其他密度的只能丟棄;
d.離心所需要的超速離心機(jī)及相匹配的轉(zhuǎn)子對于一些小型的實(shí)驗(yàn)室來說可能并不容易達(dá)到,上海盧湘儀生產(chǎn)的離心機(jī)中有高速離心機(jī)可以達(dá)到相關(guān)實(shí)驗(yàn)的參數(shù)。
對于后者來說,有個(gè)關(guān)鍵性選擇——抗體,確切的說叫特異性抗體.
必須能夠特異性識別并且能夠到達(dá)位于靶細(xì)胞器上的抗原表位。如果抗原表位被包埋在細(xì)胞器的內(nèi)部,則與磁珠相結(jié)合的抗體可能就很難達(dá)到。
它很好的填補(bǔ)了傳統(tǒng)分析法的缺陷,但是一次量小,而且需要的抗體量大。
但是無論那種方式,我們都需要一臺適合的離心機(jī),像TD3細(xì)胞涂片離心機(jī)這種,微機(jī)控制,直流無刷電機(jī)驅(qū)動(dòng),運(yùn)行穩(wěn)定、噪音低、轉(zhuǎn)速精度高。數(shù)字屏顯示,人性化界面,操作簡單便捷。實(shí)時(shí)rpm/RCF之間讀數(shù)換算與設(shè)定,方便快捷。配備電子門鎖,設(shè)有門蓋自鎖、超速等多種保護(hù)功能;故障自動(dòng)報(bào)警功能,安全可靠。
廣泛適用于免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室、檢驗(yàn)室、研究室、可進(jìn)行紅細(xì)胞血清學(xué)實(shí)驗(yàn),做抗原、抗體的鑒定 及庫姆式實(shí)驗(yàn)的結(jié)果判斷等,是各級醫(yī)院血庫、實(shí)驗(yàn)室、血站、醫(yī)學(xué)院校和醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)用于婦科切片、TCT、腦積液的必備設(shè)備。
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