高速離心機親水材質(zhì)有效對接梯度介質(zhì)
發(fā)布時間：2017-6-16 18:58:4??????點擊：
高速離心機具有外型美觀、含量大、體積小、重量輕、噪聲低、振動小、定時控制等優(yōu)點。可供血漿、血清、尿素及疫苗制造等離心沉淀分離用。隨著分子生物學(xué)，遺傳工程研究和應(yīng)用的發(fā)展，離心分離技術(shù)也經(jīng)歷了數(shù)代更換，由低速離心機，高速離心機，超速離心機到超速冷凍離心機，超大容量冷凍離心機。
高速離心機將裝有不均一顆粒的離心管在臺式大容量冷凍離心機中高速旋轉(zhuǎn)，大小、密度不同的顆粒會以各自的沉降速率移向離心管底部。如果設(shè)計一定的轉(zhuǎn)速和時間，沉降速率最大的首先沉降到離心管底部，沉降速率中等和較小的組分繼續(xù)留在上清液中。將上清液轉(zhuǎn)移到另一離心管中，提高轉(zhuǎn)速并掌握一定的時間，可獲得沉降速率中等的組分。如此反復(fù)操作，可實現(xiàn)不同組分的分離。
高速離心機驅(qū)動系統(tǒng)由電機、驅(qū)動軸和減震機構(gòu)等組成。采用交流變頻電機，密封預(yù)潤滑式驅(qū)動軸，減震機構(gòu)降低了離心機工作時的振動和噪音。高速離心機制備的提副業(yè)是凹狀梯度時，與凸?fàn)钐荻认喾?，最先從混合室里流到離心管的是重端梯度液，制備時，輕液要緩慢的鋪上，因而要求針頭以相應(yīng)的速度抬起，在多數(shù)情況下，只是簡單的將離心管斜放一定角度，將針頭烤放于離心管口，使溶液沿管壁緩緩流下，逐步鋪上，加完后，再把離心管垂直放好加樣。此時應(yīng)注意的是，所選用高速離心機離心管的材料最好是親水性的，如是憎水性離心管，可用一些鹽，這樣再加入梯度溶液時，可保證均勻的流下。
高速離心機梯度介質(zhì)的選用：
?。?）鹽梯度介質(zhì)。
?。?）小分子有機物如蔗糖。
（3）三碘化苯衍生物。
?。?）有機高聚物。
?。?）膠態(tài)二氧化硅。
高速離心機梯度的密度范圍：
（1）速率區(qū)帶離心的介質(zhì)密度小于樣品中各種顆粒的密度。
?。?）等密度區(qū)帶離心的介質(zhì)密度大于樣品中各種顆粒的密度。
高速離心機梯度的容量：
指在達到分離要求的前提下，梯度介質(zhì)容納樣品的最大數(shù)量。
（1）與樣品組成和分離要求有關(guān)。
?。?）與梯度總體積、斜率和介質(zhì)粘度有關(guān)。
（3）與轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)子形式有關(guān)。
高速離心機為了密度梯度和樣品區(qū)帶的穩(wěn)定，加到密度梯度液柱頂部樣品的密度必須小于梯度液頂部的密度，如果不是這樣，樣品將以塌陷的方式通過梯度，直到到達等密度區(qū)。高速離心機在這個過程中樣品層將明顯的擴展，纏上的小滴沉降會造成區(qū)帶分辨力下降。
高速離心機將裝有不均一顆粒的離心管在臺式大容量冷凍離心機中高速旋轉(zhuǎn)，大小、密度不同的顆粒會以各自的沉降速率移向離心管底部。如果設(shè)計一定的轉(zhuǎn)速和時間，沉降速率最大的首先沉降到離心管底部，沉降速率中等和較小的組分繼續(xù)留在上清液中。將上清液轉(zhuǎn)移到另一離心管中，提高轉(zhuǎn)速并掌握一定的時間，可獲得沉降速率中等的組分。如此反復(fù)操作，可實現(xiàn)不同組分的分離。
高速離心機驅(qū)動系統(tǒng)由電機、驅(qū)動軸和減震機構(gòu)等組成。采用交流變頻電機，密封預(yù)潤滑式驅(qū)動軸，減震機構(gòu)降低了離心機工作時的振動和噪音。高速離心機制備的提副業(yè)是凹狀梯度時，與凸?fàn)钐荻认喾?，最先從混合室里流到離心管的是重端梯度液，制備時，輕液要緩慢的鋪上，因而要求針頭以相應(yīng)的速度抬起，在多數(shù)情況下，只是簡單的將離心管斜放一定角度，將針頭烤放于離心管口，使溶液沿管壁緩緩流下，逐步鋪上，加完后，再把離心管垂直放好加樣。此時應(yīng)注意的是，所選用高速離心機離心管的材料最好是親水性的，如是憎水性離心管，可用一些鹽，這樣再加入梯度溶液時，可保證均勻的流下。
高速離心機梯度介質(zhì)的選用：
?。?）鹽梯度介質(zhì)。
?。?）小分子有機物如蔗糖。
（3）三碘化苯衍生物。
?。?）有機高聚物。
?。?）膠態(tài)二氧化硅。
高速離心機梯度的密度范圍：
（1）速率區(qū)帶離心的介質(zhì)密度小于樣品中各種顆粒的密度。
?。?）等密度區(qū)帶離心的介質(zhì)密度大于樣品中各種顆粒的密度。
高速離心機梯度的容量：
指在達到分離要求的前提下，梯度介質(zhì)容納樣品的最大數(shù)量。
（1）與樣品組成和分離要求有關(guān)。
?。?）與梯度總體積、斜率和介質(zhì)粘度有關(guān)。
（3）與轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)子形式有關(guān)。
高速離心機為了密度梯度和樣品區(qū)帶的穩(wěn)定，加到密度梯度液柱頂部樣品的密度必須小于梯度液頂部的密度，如果不是這樣，樣品將以塌陷的方式通過梯度，直到到達等密度區(qū)。高速離心機在這個過程中樣品層將明顯的擴展，纏上的小滴沉降會造成區(qū)帶分辨力下降。
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